酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附劑測定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

簡寫

ELISA或ELASA

類型

概念

本試劑盒采用咔唑比色法測定總果膠含量。即總果膠在稀酸中水解為半乳糖醛酸，在硫酸溶液中與咔唑進(jìn)行縮合反應(yīng)，生成紫紅色物質(zhì)，經(jīng)光譜掃描該物質(zhì)在530nm處有最大吸收峰，顏色深淺與總果膠含量成正比，進(jìn)而得出總果膠含量。

本試劑盒采用雙抗體夾心法測定樣品中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加入顯色底物。酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)的濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度（OD 值），通過制作標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。