ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來(lái)自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。

發(fā)展前景
臨床測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展，而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。分子生物學(xué)正在并最終肯定會(huì)讓對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí)，其對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的，對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定，并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。
主要設(shè)備
試劑
（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸餾水至1000ml
（2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 　0.2克
Na2HPO4·12H2O　2.9克
NaCl　8.0克
KCl　0.2克
Tween-20　0.05%　0.5ml
加蒸餾水至1000ml
（3）　稀釋液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
（4）　終止液（3M　H2SO4）：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。
（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml
加蒸餾水50ml。
（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml無(wú)水乙醇）0.5ml
底物緩沖液（PH5.5）　 10ml
0.75%H2O2　 　32μl
（7）　ABTS使用液:
ABTS　0.5mg
底物緩沖液（PH5.5）　 1ml
3%H2O2　 　2μl
（8）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
（9）　正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。
器材
（1）　聚苯乙烯塑料板（簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板）40孔或96孔，ELISA檢測(cè)儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。